摘 要:生物體液中的鎘含量很低,通常用石墨爐原子吸收法測定。但由于鎘的灰化溫度太低,在250℃就開始損失(對于平臺石墨管來說),以及基體共存元素的嚴重干擾,使得測定比較困難。報道較多的是選用化學改進劑,以提高鎘的灰化溫度,達到減少或消除共存元素的干擾的目的。本文對化學改進劑進行優(yōu)選,zui終確認用金屬涂層平臺石墨管,配合使用脲和硝酸鎂化學改進劑,在克服基體共存元素的干擾方面取得了較好的結(jié)果。
關(guān)鍵詞:鎘;尿;涂層平臺石墨管;化學改進劑;石墨爐原子吸收光譜法
1 實驗部分
1.1儀器
PerkinElmer800原子吸收分光光度計;YY3平臺石墨管(金屬涂層 自制);塞
曼效應(yīng)扣除背景。儀器工作條件見表1。
表1 儀器工作條件①
波長 l/nm | 燈電流 I/mA | 狹縫 b/nm | 載氣氬mL/min 干燥灰化清除原子化 | 干燥1 溫度時間 | 干燥2 溫度時間 | 灰化 溫度時間 | 原子化 溫度時間 | 清除 |
溫度時間 |
2288 | 4 | 0.7 | 250 0 | 20~100 5/25 | 120 15/30 | 350 15/20 | 1700 0/3 | 2200 1/4 |
①溫度單位為℃;時間單位為s。
1.2試劑
1 ng/mL、2 ng/mL Cd標準液:由1000 ng/mL Cd標準溶液逐級稀釋而成。1%NH4H2PO4(GR)、1%(NH4)2SO4(AR)、0.1%Mg(NO3)2(AR)、1%Vc
(AR)、1%酒石酸(GR)、1%檸檬酸(GR)、1%EDTA(AR)、和1%脲(AR)。10%鎢鹽溶液。
1.3涂層管的制備
新的石墨管老化一次后,將其*浸入含10% 鎢鹽溶液24 h以上,晾干備用。測定樣品前再向石墨管中涂20 mL 10%鎢鹽溶液,連續(xù)涂三次,升溫程序同鎘。
1.4樣品的收集及處理
收集晨尿不小于100 mL,充分混勻測定比重(比重>1.030或<1.010棄去),取1 mL尿液于10 mL比色管中,用1%脲定容至10 mL混勻,進樣20 mL(樣品)+5 mL 0.1% Mg(NO3)2進行測定。當超出標準線性范圍的120%時,應(yīng)用儀器的在線稀釋功能。
1.5標準曲線
取不接觸鎘的正常人混合尿(比重1.010~1.030)稀釋10倍后,用標準加入法制作標準曲線,用儀器的自動稀釋功能作鎘的濃度為0.25、0.50、1.00 mg/L的標準系列。
2 結(jié)果與討論
2.1化學改進劑的選擇
尿液中含有大量的有機物和無機鹽類,從而產(chǎn)生嚴重的基體干擾。本文選擇了各種有機和無機改進劑進行了篩選發(fā)現(xiàn),選用未經(jīng)鎢鹽涂覆的石墨管進行測定,在*測定條件下背景干擾較重。選用鎢鹽涂覆的石墨管直接進行測定,背景干擾有一定程度改善;再在此基礎(chǔ)上分別用1% NH4H2PO4(GR)、1%(NH4)2SO4(AR)、0.1% Mg(NO3)2(AR)、1% Vc(AR)、1%酒石酸(GR)、1%檸檬酸(GR)、1% EDTA(AR),和1%脲(AR)等,在*測定條件下背景也在0.8~1.5左右。本文將有機改進劑和無機改進劑聯(lián)合使用發(fā)現(xiàn),除了Vc和脲與硝酸鎂聯(lián)合使用外,其他的背景都沒有顯著改善。Vc、硝酸鎂和鎢鹽涂覆石墨管聯(lián)合應(yīng)用與脲、硝酸鎂和鎢鹽涂覆石墨管聯(lián)合應(yīng)用雖然都可以將背景降到以前的三分之一至五分之一,但是通過這兩者相比較(表1),本文zui終選擇了脲和硝酸鎂作聯(lián)合改進劑。
表1 基體改進劑的選擇
項目 | Vc+硝酸鎂 (鎢鹽涂層石墨管) | 脲+硝酸鎂 (鎢鹽涂層石墨管) |
灰化溫度(℃) | 300 | 350 |
精密度(RSD/%) | 5~10 | 2~6 |
背景干擾(依據(jù)尿中基體 復雜程度不同) | 背景峰0.1~0.5 | 背景峰0.04~0.4 |
靈敏度(1ng/mL) | Area 0.045~0.055 | Area 0.050~0.060 |
2.2標準曲線的線性范圍
經(jīng)過多次測定,標準曲線的鎘濃度在0~3 mg/L線性關(guān)系良好,但尿中鎘的生物接觸限值為5 mg/L,所以在尿稀釋10倍后,選擇標準zui高點達到1 mg/L即可。其相關(guān)系數(shù)為0.9992。
2.3準確度和精密度
于樣品試液中加入相當于濃度為0.25、0.50、0.7 mg/L鎘標準,按選定條件進行測定,結(jié)果見表2。
表2 樣品加標回收率和精密度
r/(mg·L-1) | 回收率均值/% | RSD/% |
加標濃度 | 樣品濃度均值 | 測定濃度均值 |
2.5 | 2.50 | 5.11 | 104.4 | 3.2 |
5.0 | 0.13 | 4.95 | 96.4 | 5.4 |
7.0 | 2.26 | 9.27 | 100.1 | 1.0 |
2.4 檢出限
以連續(xù)10次測定試劑空白響應(yīng)值的3倍標準差代入標準曲線回歸方程計算,方法檢出限為0.12 mg/L。
3 結(jié)語
本文用直接進樣平臺原子吸收光譜法,結(jié)合使用金屬涂覆石墨管和脲、硝酸鎂
聯(lián)合改進劑,簡化樣品的前處理,降低了樣品的背景干擾,取得較為滿意的結(jié)果。